Вестернблоты - Иммуноблоты                         

 

Вестернблот Chlamydia Trachomatis

 

Вестернблот для определения IgG и IgA антител против различных антигенов

Chlamydia Trachomatis

Краткое изложение и объяснение теста

Это тест используется для доказательства этиологической роли бактерии Chlamydia Trachomatis при хронических воспалениях, вызывающих бесплодие, а также реактивных артритах. Только используя технику вестернблота, можно доказать этиологическую роль Chlamydia Trachomatis в возникновении ведущих к бесплодию хронических воспалений малого таза, а также реактивных артритов.

При наличии ведущего к бесплодию хронического сальпингита в мазках из шейки матки очень часто бывает трудно выделить антиген вызывающей его инфекции Chlamydia Trachomatis. Ключевую роль в постановке этиологического диагноза принадлежит серологическим методам. Наличие в крови больного IgG и IgA антител к антигенам Chlamydia Trachomatis является доказательством этиологической роли Chlamydia Trachomatis в возникновении заболевания. То же самое касается роли инфекции Chlamydia Trachomatis в возникновении реактивного артрита. Однако рутинный иммуноферментный анализ не позволяет дифференцировать Chlamydia Trachomatis от Chlamydia Pneumonia. Используя технику вестернблота, по наличию антител против тепловых шоковых белков можно четко дифференцировать инфекцию Chlamydia Trachomatis от инфекции Chlamydia Pneumonia.

Бактерии Chlamydia являются облигатными внутриклеточными организмами.

Выделяют три вида бактерий Chlamydia:

bullet

Chlamydia Trachomatis

bullet

Chlamydia Pneumonia

bullet

Chlamydia Psittaci

При внутриклеточном развитии бактерий Chlamydia появляются два характерных внутриклеточных включения – элементарные инфекционные тела и ретикулярные тела, которые быстро увеличиваются в своем количестве.

Все бактерии Chlamydia имеют общий групповой антиген, который является липополисахаридом. Для выявления различных видов бактерий Chlamydia используют выявление антител к  основному наружному мембранному белку (Major Outer Membrane Proteins - MOMPS) для дифференцирования  Chlamydia Trachomatis от Chlamydia Psittaci, и выявление других  поверхностных белков для выявления бактерии Chlamydia Pneumonia.

Штамм Chlamydia Trachomatis разделяется на три биовара:

bullet

Trachomatis

bullet

Lymphogranuloma venereum

bullet

Biovar mouse

Трахома и венерическая лимфогранулома патогенны исключительно для человека и могут быть классифицированы по 15 особым характерным признакам заболевания:

Серовар

Заболевание

AC

Трахома

DK

Коньюнктивит с включениями, не-гонококковый уретрит, епидимит, слизисто-гнойный цервицит, женский уретральный синдром, эндометрит, сальпингит, перигепатит, пневмония новорожденных, реактивнй артрит

L1 – L3

Паховая лимфогранулема

У мужчин с негонококковым уретритом реактивный артрит чаще появляется при инфицировании сероваром D – K, иногла сероваром L1-L3, в сочетании с наличием HLA-B27. Диагноз ставится на основании выделения патогенных бактерий Chlamydia (выявление внутриклеточных включений при  прямой микроскопии), выявления антигена или антител методом иммуноферментного анализа или методом ELISA, также метод ПЦР или с помощью техники вестернблота. При длительном течении урогенитальной инфекции и при развитии реактивного артрита, антиген бактерии часто не определяется, и диагноз возможен только на основании серологических методов (определение антител).

Вестернблот для определения IgG и IgA антител против различных антигенов Chlamydia Trachomatis

Анализ получаемых на тестовой мембране полосок и интерпретация результатов

С помощью данного вестернблота возможно дифференцировать следующие антигены Chlamydia Trachomatis:

bullet

LPS Липополисахариды различного молекулярного веса характерны как для Chlamydia Trachomatis  так и для Chlamydia Pneumoniae

bullet

HSP (Heat shock proteins) – Тепловые шоковые белки - 60 kD и 70 kD – не являются специфичными белками, однако их выявление важно для распознавания хронической инфекции

Антигены, специфичные для Chlamydia Trachomatis:

bullet

MOMP 1 (40 kD) – Major Outer Membrane Proteins – Основной наружный мембранный белок

bullet

MOMP 1‘ (38 kD) 45 kD, 29 kD, 80 kD - Major Outer Membrane Proteins - Основной наружный мембранный белок

bullet

Специфический антиген с молекулярным весом 57 kD

Специфичность

Часто отмечается перекрестная реакция между Chlamydia Trachomatis and Chlamydia Pneumoniae. Однако антитела против антигенов Chlamydia Pneumoniae появляются только как слабо выраженная полоска в области MOMP 1. Этой полоской можно пренебречь. Возможно, это вызывается связью между слабо аффинными антителами. Полоска MOMP 1‘ почти всегда появляется вместе с полоской MOMP 1 (очень редко самостоятельно). Тестовая система вестернблота построена таким образом, что острая первичная инфекция не выявляется. Система разработана для выявления хронической инфекции (реактивный артрит, бесплодие, воспаление органов малого таза).

Интерпретация:

IgG: Возможно положительный результат – выявление 1 специфичной полоски и значительно выраженной полоски MOMP 140 kD (интенсивность на сканнере выше 35 %).

IgG: Положительный результат – выявление 2 специфических полосок и значительно выраженной полоски MOMP 1 - 40 kD (интенсивность на сканнере выше 35 %).

IgA: Возможно положительный результат – выявление 1 значительно выраженной полоски MOMP 1  -  40 kD (интенсивность на сканнере выше 35 %).

IgA:Положительный результат – выявление 1 значительно выраженной специфической полоски и значительно выраженной полоски MOMP 1 40 kD (интенсивность на сканнере выше 35 %).

Примечания:

bullet

Для выявления хронической стадии заболевания важно наличии антител против  тепловых шоковых белков -  HSP (Heat shock proteins) – Тепловые шоковые белки - 60 kD и 70 kD.  

bullet

Наличие антител против HSP 60 kD часто сочетается с бесплодием и первичными абортами.

bullet

Реактивный артрит, вызванный Chlamydia Trachomatis, часто сочетается с наличием антител против специфического антигена с молекулярным весом 57 kD.

bullet

Наличие IgA антител против Chlamydia Trachomatis также свидетельствует об этиологической роли хламидий в развитии реактивного артрита.

Примеры интерпретации:

Давно перенесенная инфекция

IgA: отрицательный, IgG: наличие полосок в области MOMP 1 и HSP 60, 70 kD

Обычно протекающая инфекция

IgA: отрицательный, IgG: наличие полосок в области MOMP 1 и несколько специфических полосок

Хроническая инфекция, вызывающая реактивный артрит или воспаление Фалопиевых труб (сальпингит) –

IgA: наличие полосок в области MOMP 1 + 1 специфическая полоска * HSP +

IgG: наличие полосок в области MOMP 1 + 1 специфическая полоска * HSP +

Острая инфекция или реинфекция

IgA: наличие полосок в области MOMP 1 + несколько специфических полосок

IgG: наличие нескольких специфических полосок

 

Обратная связь

E-mail: postmaster@westernblot.ru

Вы можете сделать данные тесты www.fides-lab.ru

Тел: 8 (495) 401 05 77

Москва, Алтуфьевское шоссе 9 (Метро Владыкино)