Вестернблоты - Иммуноблоты
поставляемые материалы и реактивы
|
Единица теста |
8 Тестов |
|
Нитроцеллюлозная мембрана (полоска) с соответствующими антигенами |
8 стрипов |
|
Блокирующий буфер (мутный), (хорошо перемешивайте перед использованием!), готов для применения |
1 флакон - 20 мл |
|
Коньюгат –бараньи анти-человеческие IgG антитела (связанные со щелочной фосфатазой), концентрированный |
1 флакон - 0,1 мл |
|
Коньюгат –бараньи анти-человеческие IgА антитела (связанный со щелочной фосфатазой), концентрированный |
1 флакон - 0,1 мл |
|
Коньюгат –бараньи анти-человеческие IgM антитела (связанный со щелочной фосфатазой), концентрированный |
1 флакон - 0,1 мл |
|
Субстрат (BCIP), готовый для применения |
1 флакон - 10 мл |
|
Стоп раствор (3 % acetic acid), готовый для применения |
1 флакон - 20 мл |
|
Раствор для разведения сыворотки и промывочный буфер (SDW-буфер), 10x концентрированный |
1 флакон - 20 мл |
технические характеристики
|
Анализируемая субстанция: |
Сыворотка крови |
|
Требуемое количество сыворотки крови для анализа: |
20 мкл на 1 тест |
|
Время инкубации: |
15 + 40 + 30 + 15 + 3 минут при комнатной температуре (20 – 25 °C) на шейкере |
|
Субстрат: |
5-bromo-4-chloro-3-indolyl-phosphate/nitroblue-tetrazolium |
|
Хранение: |
при 2 - 8 °C (холодильник) |
|
Упаковка: |
8 стрипов/80 стрипов - (10 x 8 or 5 x 16) |
технические замечания и критерии контроля качества
Не изменяйте ничего в рекомендуемом протоколе!
Температура в помещении ниже 18 °C и выше 28 °C может влиять на проявление поперечных полосок на мембране. Время инкубации с субстратом должно тщательно соблюдаться. При температуре выше 28 °C инкубация с субстратом должна быть остановлена быстрее, чем в рекомендованном протоколе для избежания перекрашивания поперечных полосок на мембране. Противоположное должно применяться при температуре ниже 18 °C. Рекомендованное время для инкубации с субстратом является ориентировочным.
Храните все компоненты набора при температуре 2 – 8 °C в холодильнике!
Все компоненты поставляемого набора предназначены для совместного интегрального использования. Из этого следует, что компоненты из различных лотов не должны перемешиваться между собой. Это особенно касается шаблонов, поставляемых с каждым набором.
Шаблон должен использоваться только с мембранами данного набора.
Не используйте наборы или компоненты набора после истечения срока годности набора. Срок годности набора нанесен на упаковке.
Эффективная промывка несвязанных компонентов сыворотки крови является фундаментальным компонентом процедуры теста иммуноблота. Таким образом, процедура промывки должна проводиться особо тщательно. Недостаточная промывка будет давать ошибочные результаты и выраженное фоновое окрашивание.
Критерии стандарта качества
Данный тест иммуноблота изготовляется в наборах по 8 (10) или 80 (20) мембран. 2 из 10 мембран проявляются с контрольной сывороткой. Одна из проявленных мембран доставляется в проявленном состоянии и находится в каждом наборе. Другая мембрана документируется на производстве. Используя эти две маркированные мембраны, делается шаблон. Шаблон указывает точное положение антигенов на непроявленных мембранах. Таким образом, проведение контрольного теста не является необходимостью для анализа появляющихся поперечных полосок на мембране.
Для контроля за должным состоянием каждой мембраны, на нее нанесена контрольная поперечная полоска на 1 см ниже верхнего края мембраны. Эта поперечная полоска на мембране должна проявиться в любом случае (у любого пациента). Если эта полоска не проявляется или проявляется очень слабо, это свидетельствует, что один из реагентов не был добавлен или был испорченным (ухудшенным).
E-mail: postmaster@westernblot.ru
Вы можете сделать данные тесты www.fides-lab.ru
Тел: 8 (495) 401 05 77
Москва, Алтуфьевское шоссе 9 (Метро Владыкино)